Флуоресцентный имиджинг с определением времени релаксации флуорофора

          Волоконный лазер генерирует световые импульсы длительностью 500 пс на длине волны 525 нм  с частотой повторения 100-200 кГц и средней мощностью 17 мВт. Волоконный выход лазера совмещен с коллиматором и вращающимся оптическим гомогенизатором для получения равномерного поля засветки на объекте исследования. Флуоресцентное свечение, возбуждаемое в объекте исследования, регистрируется камерой с усилителем изображения, основанным на многоканальном фотокатоде (MCP-based ICCD), с временным стробированием 200 пс.

          Данная камера регистрирует последовательность флуоресцентных изображений, зарегистрированных с различными временными задержками относительно импульса, возбуждающего флуоресценцию. На основе данной последовательности в каждой точке флуоресцентного изображения строится зависимость интенсивности свечения от времени, по которой оценивается время релаксации флуорофора.

          Внешний вид установки:

bioimaging_products1_clip_image002          Схема:

bioimaging_products1_clip_image004

          Пример расчета времени релаксации флуорофора в каждой точке изображения (f) для модельного эксперимента с капсулой, содержащей флуоресцирующий белок DsRed2, имплантированной под кожу экспериментального животного ex vivo (Эксперименты были проведены совместно с Институтом биохимии им. А.Н. Баха РАН (г. Москва)):

bioimaging_products1_clip_image002

          Результаты определения времени релаксации флуорофора в in vivo эксперименте с подкожной опухолью, экспрессирующей флуоресцирующий белок TurboRFP в животном линии NUDE (Эксперименты были проведены совместно с Институтом биохимии им. А.Н. Баха РАН (г. Москва)):

bioimaging_products1_clip_image004_0000

Пожалуйста, обращайтесь к нам для получения дополнительной информации

          Публикации:
1. Alexander L. Rusanov, Tatiana V. Ivashina, Leonid M. Vinokurov, Ilya I. Fiks, Anna G. Orlova, Ilya V. Turchin, Alexander P. Savitsky Life-time mode of FRET measurements for red fluorescent proteins. Journal of Biophotonics, 3(12), p. 774–783 (2010).